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# Microbiologie Industrielle

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- I. Informations sur le module
- TP1 : Initiation aux techniques de criblage d'antibiotiques
  - Introduction
  - Définition du criblage d'antibiotiques
  - Matériel nécessaire
  - Méthodes
  - Observation et interprétation des résultats
  - Conclusion
- Exercice : Cocher la ou les bonnes réponses
- Exercice : Cocher la ou les bonnes réponses
- Exercice : Cocher la ou les bonnes réponses
- Exercice : Cocher la ou les bonnes réponses
- Exercice : Compte rendu
- Conclusion

Contenu :

## Méthodes

### Méthode : Lés étapes de TP

Étape 1 : Préparation des cultures bactériennes

1. Activation des souches bactériennes :

   - Prélever une colonie de chaque souche bactérienne (Gram-positive et Gram-negative) à partir d'une gélose préalablement ensemencée.

   - Inoculer chaque souche dans un tube contenant 5 mL de bouillon nutritif.

   - Incuber les tubes à 37°C pendant 18-24 heures pour obtenir une culture en phase exponentielle de croissance

2. Standardisation des cultures :

   - Après incubation, ajuster la turbidité des cultures bactériennes à une densité optique (DO) de 0,5 à 600 nm (équivalent à environ 1 x 10^8 UFC/mL).

   - Diluer les cultures si nécessaire avec du bouillon nutritif stérile pour atteindre la densité souhaitée.

standardization de la dose | Informations[1]

Étape 2 : Préparation des boîtes de Petri

1. Ensemencer les boîtes de Petr i :

- Prélever 100 µL de chaque culture bactérienne standardisée et les déposer au centre d'une boîte de Petri contenant de la gélose Mueller-Hinton.

- Étaler uniformément la culture sur toute la surface de la gélose à l'aide d'une épaisseur stérile.

- Laisser sécher les boîtes pendant 10-15 minutes à température ambiante.

Ensemencement des boites de Pétri | Informations[2]

Étape 3 : Application des disques d'antibiotiques

1. Déposer les disques d'antibiotiques:

   - À l'aide d'une pince stérile, déposer délicatement les disques d'antibiotiques sur la surface de la gélose ensemencée.

   - Espacer les disques d'au moins 2 cm pour éviter toute interférence entre les zones d'inhibition.

   - Appuyer légèrement sur les disques pour qu'ils adhèrent bien à la gélose.

2. Identifier les disques

   - Noter la position de chaque antibiotique sur la boîte de Petri pour faciliter l'identification ultérieure des résultats.

application des disques d'antibiotique | Informations[3]

NOTE:

Parce qu'une partie du médicament se diffuse presque instantanément, un disque ne doit pas être déplacé une fois qu'il a été en contact avec la surface de la gélose. Au lieu de cela, placez un nouveau disque dans un autre emplacement sur la gélose.

Il faudrait comparer la CMI aux concentrations critiques inférieure et supérieure afin de déterminer les caractères sensible, intermédiaire ou résistant de la bactérie vis-à-vis de cet antibiotique

- Grâce à la droite de concordance, déterminer la sensibilité et la résistance revient pour un antibiogramme réalisé dans les conditions standards à comparer le diamètre d'inhibition mesuré (∅ mesuré) et les diamètres critiques d(CCsup) et D(CCinf).

déposition des disques d'antibiotique | Informations[4]

Étape 4 : Incubation

1. Incubation des boîtes de Petri :

- Placer les boîtes de Petri à l'envers dans un incubateur à 37°C pendant 18-24 heures.

- Cette période permet aux bactéries de croître et aux antibiotiques de diffuser dans la gélose.

But d'incubation | Informations[5]

Étape 5 : Nettoyage et élimination des déchets

1. Elimination des déchets :

   - Placer toutes les boîtes de Petri, pipettes, et autres matériels contaminés dans un sac de déchets biologiques.

2. Nettoyage du poste de travail :

- Désinfecter les surfaces de travail avec un désinfectant approprié.

- Laver les mains soigneusement après avoir retiré les gants.

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2. Dr. Hansal Nabila |

3. Dr. Hansal Nabila

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